多肽固相合成的基本原理

日期:2020-08-09 07:36
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摘要:
固相合成的基本原理   
     
 
多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,固相合成顺序一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法,现在多采用固相合成法,从而大大的减轻了每步产品纯化的难度。为了防止副反应的发生,参加反应的氨基酸的侧链都是被保护的;而羧基端是游离的,并且在反应之前必须活化。化学合成方法有两种,即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc存在很多优势,现在大多采用Fmoc法合成,如图:
 
     
 
 
     
 
每个循环由以下三步反应构成,反复循环直到肽链延伸至所需长度时即可完成。
 
 
1. 脱保护:Fmoc保护的氨基酸必须用一种碱性溶剂(piperidine)去除氨基的保护基团。
2. 活化:待连接的氨基酸的羧基被活化剂所活化。
3. 偶联:活化的羧基与前一个氨基酸裸露的氨基反应,形成肽键。在此步骤使用过量的试剂促使反应完成。